熱啟動PCR的優(yōu)勢

欄目：公司新聞發(fā)布時間：2022-09-21

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）由1983年美國Mullis首先提出設(shè)想，到至今，PCR已發(fā)展到第三代技術(shù)。

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）由1983年美國Mullis首先提出設(shè)想，到至今，PCR已發(fā)展到第三代技術(shù)。
PCR擴(kuò)增流程圖：

在傳統(tǒng)的PCR反應(yīng)中，利用冰上配制反應(yīng)體系，來盡量避免Taq酶在常溫有部分活性的問題，來解決引物錯配和二聚體引起的非特異性擴(kuò)增等現(xiàn)象，但是無法完全解決非特異性產(chǎn)物，造成實驗結(jié)果的不準(zhǔn)確性。熱啟動型PCR能夠很好的解決上述問題，是最常用的提高PCR特異性的方法。
熱啟動PCR(hot start PCR)是指DNA聚合酶只有在樣品溫度至少超過70℃時才發(fā)揮作用的PCR。通過這種方式控制PCR反應(yīng)的必須組分DNA聚合酶，直到反應(yīng)混合物被加熱到可以阻止非特異引導(dǎo)和引物聚合的溫度后，再啟動PCR達(dá)到有效擴(kuò)增特異性PCR產(chǎn)物的目的。
抗體法修飾熱啟動酶原理圖：

熱啟動PCR的應(yīng)用方面較為廣泛，不僅有效防止非特異性PCR產(chǎn)物，而且在較難擴(kuò)增的PCR反應(yīng)如單拷貝基因的擴(kuò)增、多重PCR和超長片段的擴(kuò)增等應(yīng)用尤為突出，大大改觀了傳統(tǒng)PCR技術(shù)的局限性。在病原微生物檢測、遺傳病診斷和法醫(yī)鑒定等各個領(lǐng)域等實際應(yīng)用中頗為廣泛。在應(yīng)對全球爆發(fā)的新冠疫情方面，熱啟動酶亦貢獻(xiàn)頗多。目前市面上應(yīng)用于SARS-Cov-2的一步法RT-qPCR檢測試劑的核心酶基本都是抗體法熱啟動酶。

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東盛一管式PCR預(yù)混液不僅使用方便，而且性能優(yōu)異，通過抗體修飾的熱啟動改造進(jìn)一步提升了產(chǎn)品的特異性和擴(kuò)增效率等性能。

部分產(chǎn)品升級對比圖

高保真PCR--Pfu Mix——在保證保真度的基礎(chǔ)上顯著提高PCR擴(kuò)增效率：

高效率PCR--Plus Mix——在原有高擴(kuò)增效率的基礎(chǔ)上進(jìn)一步提高特異性：

染料法qPCR Mix ——抗體修飾升級，曲線更完美：

東盛生物專注研發(fā)與生產(chǎn)PCR相關(guān)產(chǎn)品17余年，客戶遍布海內(nèi)外40多個國家和地區(qū)，產(chǎn)品涵蓋DNA聚合酶、PCR預(yù)混液、熒光定量qPCR預(yù)混液、一步法RT-qPCR預(yù)混液等產(chǎn)品，不僅可用于生命科學(xué)基礎(chǔ)研究，而且可作為核心工業(yè)原料賦予各類分子診斷產(chǎn)品精準(zhǔn)的檢測能力。

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